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用分光光度法測定土壤中的氨氮的含量

時間:2023-02-11 09:48:46   訪客:5634

氨氮是指以游離氨和銨離子形式存在的氮。氨氮是土壤中一種重要的污染因子,對土壤中氨氮進行監(jiān)測能夠掌握其污染狀況。本文參考《HJ634-2012 土壤 氨氮的測定 氯化鉀溶液提取-分光光度法》,應(yīng)用分光光度法測定土壤中氨氮含量。

實驗準備

1.1方法原理

氯化鉀溶液提取土壤中的氨氮,在堿性條件下,提取液中的氨離子在有次氯酸跟離子存在時與苯酚反應(yīng)生成藍色靛酚染料,在630nm波長具有大吸收。在一定濃度范圍內(nèi),氨氮濃度與吸光度值符合朗伯-比爾定律。

1.2儀器設(shè)備

1.3 試劑

除非另有說明,分析時均使用符合國家標準的分析純試劑,實驗用水為電導率小于0.2ms/m(25℃時測定)的去離子水濃硫酸ρ(H2SO4)=1.84g/ml二水檸檬酸鈉、二氯異氰尿酸鈉、氯化鉀、氯化銨、苯酚

1.4試劑配制

1.4.1 氯化鉀溶液(1mol/L):稱取74.55g氯化鉀,用適量水溶解,移入1000ml容量瓶中,用水定容、混勻。

1.4.2 氯化銨標準貯備液(200mg/L):稱取0.764g氯化銨(105℃下烘干2h),用適量水溶解,加入0.30ml濃硫酸,冷卻后移入1000ml容量瓶中,用水定容,混勻。該溶液在避光、4℃下可保存一個月。

1.4.3 氯化銨標準使用液(10mg/L):量取5.0ml氯化銨標準貯備液于100ml容量瓶中,用水定容、混勻。用時現(xiàn)配。

1.4.4 苯酚溶液:稱取70g苯酚溶于1000ml水中。該溶液貯存于棕色玻璃瓶中,在室溫條件下可保存一年。

1.4.5 二水硝普酸鈉溶液:稱取0.8g二水硝普酸鈉溶于1000ml水中。該溶液貯存于棕色玻璃瓶中,在室溫條件下可保存三個月。

1.4.6 緩沖溶液:稱取280g二水檸檬酸鈉及22.0g氫氧化鈉,溶于500ml水中,移入1000ml容量瓶中,用水定容、混勻。

1.4.7 硝普酸鈉-苯酚顯色劑:量取15ml二水硝普酸鈉溶液及15ml苯酚溶液和750ml水,混勻。該溶液用時現(xiàn)配。

1.4.8 二氯異氰尿酸鈉顯色劑:稱取5.0g二氯異氰尿酸鈉溶于1000ml緩沖溶液中,4℃下可保存一個月。

實驗過程

2.1 標樣測定

分別量取0、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、3.50ml氯化銨標準使用液于一組100ml具塞比色管中,加水至10.0ml,制備標準系列。氨氮含量分別為0、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、35.0ug。

向標準系列中加入40ml硝普酸鈉-苯酚顯色劑,充分混合,靜置15min。然后分別加入1.00ml二氯異氰尿酸鈉顯色劑,充分混合,在15℃-35℃條件下只是靜置5h。于630nm波長處,以水為參比,測量吸光度。以扣除零濃度的校正吸光度為縱坐標,氨氮含量(ug)為橫坐標,繪制校準曲線。

2.2 樣品測定

將采集后的土壤樣品去除雜物,手工或儀器混勻,過樣品篩。在進行手工混合時應(yīng)戴橡膠手套。過篩后樣品分為兩份,一份用于測定干物質(zhì)含量,另一份用于測定待測組分含量。

稱取40.0g試樣,放入500ml聚丙烯瓶中,加入200ml氯化鉀溶液,在20±2℃的恒溫水浴振蕩器中震蕩提取1h。轉(zhuǎn)移約60ml提取液于100ml聚乙烯離心管中,在3000r/min的條件下離心分離10min。然后將約50ml上清液轉(zhuǎn)移至100ml比色管中,制得試料,待測。量取10.0ml試料至100ml具塞比色管中,按照標準曲線比色步驟測定吸光度。同時做空白試驗。

實驗結(jié)果

3.1 標準曲線方程

根據(jù)標樣測定方法測量各標樣的吸光度,繪制標準曲線方程如下:

3.2 樣品測定結(jié)果

根據(jù)《HJ634-2012土壤氨氮的測定氯化鉀溶液提取-分光光度法》和《HJ613-2011土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法》進行計算,該土壤氨氮含量為15.9mg/Kg。

3.3 回收率測定

在樣品中分別加入0.1ppm和0.2ppm的標準溶液,進行加標回收率實驗測定結(jié)果。

3.4 精密度測定

對樣品重復(fù)測試11次,得到相對標準偏差RSD為0.377%。


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